木瓜蛋白酶分离浓缩超滤设备

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木瓜蛋白酶分离浓缩超滤设备 2019-04-12T22:24:10+00:00

Project Description

木瓜蛋白酶简称木瓜酶,又称木瓜酵素,是一种含巯基肽链的内切酶。该酶可以从未成熟的木瓜果实的乳汁中得到,木瓜蛋白酶由212个氨基酸残基组成,其分子量为23.5kDa,等电点为pH=9.6,相比其他微生物酶,它的成本比较低,具有广泛的特异性、热稳定性好及天然卫生安全等特点,广泛应用于酿酒、食品(柔嫩剂)、医疗(治疗水肿)、皮革、纺织和化妆品行业。

一般工业生产中,从木瓜青果中提取出来的白色乳汁经加工而成的木瓜蛋白酶酶制剂不是纯酶。这些粗酶中的主要酶成分是木瓜蛋白酶、木瓜蛋白酶Ω(也称木瓜肽酶)、木瓜凝乳蛋白酶和木瓜凝乳蛋白酶M,此外还含有少量的杂酶和大量的还原糖等。其中,木瓜凝乳蛋白酶的含量最多,占可溶性蛋白的45%,其组分又最杂,含有几十种蛋白,习惯上根据其通过离子交换柱出来的先后顺序分为木瓜凝乳蛋白酶A和木瓜凝乳蛋白酶B。制备较高纯度木瓜蛋白酶的一种方法是乙醇反复沉淀法,但是该方法乙醇消耗量大,生产成本高。

膜分离技术纯化木瓜蛋白酶

疏朗使用絮凝法作为超滤之前的预处理方法,与超滤技术结合来纯化木瓜蛋白酶,对木瓜蛋白酶的截留率在93%以上。絮凝预处理可以减少料液对膜的污染,提高超滤的膜通量,使用超滤膜则可以使小分子杂质进一步被除去,并使木瓜蛋白酶得到有效浓缩,从而在结晶步骤中,减少有机溶剂的消耗量。
  超滤纯化木瓜蛋白酶的效果

倍数 浓缩液壳
聚糖酶活力
U.mL-1
浓缩液蛋白
质浓度
μg.mL-1
浓缩液蛋
白酶活力
U.mL-1
透过液壳
聚糖酶活力
U.mL-1
透过液蛋
白质浓度
μg.mL-1
透过液蛋
白酶活力
U.mL-1
壳聚糖酶
活力收率
%
壳聚糖酶活
力透过率
%
0 3.46 1596 694.42 100
10 9.00 6560 4323.28 0.06 9.6 0.31 26 0.61

  
  超滤倍数为10倍时,透过液的蛋白质浓度极低,蛋白酶活力为0.31U/mL,壳聚糖酶活力为0.06U/mL; 浓缩液蛋白质由1596μg/mL增加到6560μg/mL,壳聚糖酶活力由3.46U/mL提高到9.00U/mL,蛋白酶活力由694.42U/mL提高到4323.28U/mL。

 

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